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EINECS編號 | 232-684-3 |
品牌 | 河北潤步 |
酶活力保存率 | 99% |
型號 | 食品級 |
別名 | 菊粉酶 |
CAS編號 | 9005-80-5 |
重金屬 | 0.001% |
英文名稱 | inulinase |
砷含量 | 0.01% |
包裝規(guī)格 | 25*1 |
酶活力 | 99 |
分子式 | C12H22O11.C6H12O6 |
有效物質(zhì)含量 | 99 |
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【產(chǎn)品簡介】
菊糖酶(菊粉酶)
菊粉最早是從菊科植物中分離出來而得名。菊粉(inulin)是一種有呋喃構(gòu)形的D一果糖經(jīng)β-2,l糖苷鍵脫水聚合而成,且在果糖殘基(F)末端連有一個葡萄糖殘基(G)的直鏈結(jié)構(gòu)多糖,是最簡單的一類果聚糖,簡寫為GFn(Edelman等,1968)。此外,Emst等(1995)報道,菊粉還含有少量另一類果聚糖(inulonose)即末端無連有G的果聚糖。
菊粉酶(inulinase)是能夠水解β-2,l-D一果聚糖果糖苷鍵的一類水解酶,學名β-2,l-D一果聚糖酶,又叫β一果聚糖酶,2,l-D一果聚糖水解酶(EC 3.2.l)。分泌菊粉酶的微生物在自然界中分布很廣,土壤、水和動物消化道中的多種微生物都能分泌。菊粉酶可以在一定的溫度條件下水解菊粉成果糖或低聚果糖。
1 菊粉酶的分類
菊粉酶有不同的分類方法。
根據(jù)菊粉酶在微生物體內(nèi)主要分布于細胞內(nèi)、細胞壁和細胞外,分別稱為胞內(nèi)酶、胞壁結(jié)合酶和胞外酶,它們的比例主要受菌種、碳源、溫度和pH的影響(Ettalibi等,1990):l)隨著溫度的升高胞外酶比例下降,而其他兩種酶比例上升;2)以菊粉或蔗糖為碳源培養(yǎng)微生物時,前者胞外酶比例高于后者,其他兩種酶則相反;3)胞外酶主要由真菌合成,細胞壁結(jié)合酶主要產(chǎn)自酵母;4)適當?shù)膒H使細胞壁通透性增大,提高了胸外酶比例,其他兩種酶比例下降。
根據(jù)作用底物方式的不同,或者說根據(jù)菊粉酶酶切果聚糖鏈方式分為內(nèi)切酶(EC3.2.1.7)和外切酶(EC3.2.1.80)。通常用I/S的大小來區(qū)分內(nèi)切型菊粉酶和外切型菊粉酶,I是以菊粉作底物時的酶活,S是以蔗糖作底物時的酶活。一般認為外切菊粉酶的I/S值比內(nèi)切菊粉酶的US低。內(nèi)切菊粉酶水解菊粉可以得到高純度低聚果糖,常由真菌分離出來。外切菊粉酶在胞內(nèi)、胞壁、胞外都有分布,它水解菊粉可以得到高純度果糖。
根據(jù)來源菊粉酶可以分為微生物菊粉酶和植物菊粉酶。
2 菊粉酶的性質(zhì)
2.l熱穩(wěn)定性絕大多數(shù)報道中,菊粉酶的最適溫度為52~64℃之間,55~58℃最適宜。
2.2 pH值對活力的影響菊粉酶最適pH為弱酸性,這一性質(zhì)不僅操作安全,而且使用過程中可以防止微生物污染,也是果糖最穩(wěn)定的pH值。
2.3 底物專一性李俊剛等(1999)認為,提高菊粉酶酶解效率的關鍵在于提高酶活和增加底物對酶作用的敏感性。據(jù)研究報道,菊粉酶不僅可以對菊粉作用,也可以對蔗糖及棉子糖作用,并表現(xiàn)出更高的活力和水解能力。使用菊芋提取液或菊粉做碳源,都能誘導產(chǎn)生菊粉酶,但菊芋提取液作底物效果更好。這可能是因為提取液除含菊粉外,還含有較多的短鏈的多聚果糖,更有利于菌體的生長以及被酶水解(Pramod等,1991)。也就是說,一定的底物可以誘導生成菊粉酶,但用不同的碳源作底物對酶的活性影響很大。研究發(fā)現(xiàn)一定濃度的菊粉、麥芽糖和低濃度的果糖能夠誘導生成菊粉酶,淀粉對菊粉酶的影響不大,葡萄糖卻能明顯地抑制菊粉酶活性。表明菊粉酶有底物專一性。
3 菊粉酶的來源
菊粉酶的來源很廣,自然界中的植物以及土壤、水和動物消化道中的多種微生物都可以分泌菊粉酶。微生物來源的菊粉酶種類多,熱穩(wěn)定性好,適于發(fā)酵生產(chǎn)。據(jù)不完全統(tǒng)計,產(chǎn)菊粉酶的有絲狀真菌17個屬物余種,酵母菌10個屬20余種,細菌12個屬10余種。目前有不少研究人員仍在致力于篩選新的產(chǎn)酶菌種,并對現(xiàn)有菌種進行改造,以得到高酶活、熱穩(wěn)定性好的生產(chǎn)菌株。大多數(shù)微生物菊粉酶均為外切型菊粉酶,并且常常呈現(xiàn)出轉(zhuǎn)化酶活力,轉(zhuǎn)化酶是一種水解蔗糖為葡萄糖和果糖的酶,對葡粉沒有作用。
4 菊粉酶的純化
菊粉酶的純化步驟一般分為:(NH4)2SO4沉淀、離子交換層析及凝膠過濾色譜等。離子交換層析可用來選擇性地分離外切型菊粉酶和內(nèi)切型菊粉酶,通常用NaCI進行線性梯度洗脫,隨著Na-CI濃度增加,內(nèi)切菊粉酶先洗出,外切酶后洗出(Azhall等,1989)。菊粉酶的提純過程:在0 ℃條件下,用40%飽和硫酸銨除雜蛋白,用90%飽和硫酸鉸析出菊粉酶,用 Sephadex G25脫鹽,聚乙二醇透析濃縮;再進行Sophadex G200層析,操作溫度10℃;然后進行DEAE一纖維素DE52離子交換層析;*4℃、120V恒壓電泳分離(賈英民等,1998)。
5 菊粉酶酶活定義
常見的酵母和真菌中分離的酶多同時具有菊粉酶和轉(zhuǎn)化酶活性,為區(qū)分兩者,人們常采用“E=菊粉酶總酶活+轉(zhuǎn)化酶總酶活”的公式,當E>0.02為菊粉酶,E<0.02則為轉(zhuǎn)化酶。菊粉酶酶活定義為在一定的反應條件下每分鐘釋放 lμmol果糖所需酶量;轉(zhuǎn)化酶酶活定義為每分鐘水解1μmol蔗糖所需的酶量。由于目前測定菊粉酶酶活的定義沒有統(tǒng)一標準,因此酶活的單位也有不同。
6 菊粉酶活的測定
6.l酶液的制備胞外菊粉酶粗酶液的制備:將發(fā)酵液過濾或離心即可得粗酶液。胞內(nèi)菊粉酶粗酶液的制備:取一定量的發(fā)酵液離心后得菌體,將菌體用 0.lmol/L PH值為 5.6的醋酸緩沖液洗滌2~3次后,加緩沖液至原體積,然后用超聲波處理(10 kHz,100W,5min)菌懸液,處理液即為胞內(nèi)菊粉酶粗酶液(肖春玲,1999)。
6.2酶活測定黎明蘭等(1995)用菊芋提取液做培養(yǎng)基。發(fā)酵后取0.05mL發(fā)酵液加4.5mL5%菊粉液,55℃反應 30min,沸水浴煮 10 min終止酶活,在同樣的反應系統(tǒng)和條件下加入沸水浴煮 10 min的酶作空白對照。取一定量反應液用費林試劑熱滴定法測糖(北京大學生物系生物生化教研室,1986)。酶活單位定義為:在上述反應條件下生成lμmol/min還原糖所需酶量為1個酶活單位。
Uhm等(1987)報道的方法是,取50 μL適當稀釋的酶液,加入450 μL 5%的菊粉(0.lmol、pH4.5的醋酸緩沖液配制),60 ℃保溫 10 min,沸水浴5 min,滅活終止反應(在完全相同的條件下滅活酶底物作對照),快速冷卻后,用Somogi-Nelson法(Derycke等,1984)測定還原糖。陳曉明等(2000)測定酶活時與Uhm的方法不同的是,用3、5-二硝基水楊酸比色法測定還原糖數(shù)量,酶活單位定義為:在上述反應條件下,每分鐘催化菊糖水解生成lμmol還原糖的酶量。
7 菊粉酶的應用前景
7.l利用菊粉酶生產(chǎn)高果糖漿由于高果糖漿價格低廉,味甜,爽口,滲透壓高,保藏效果好,熱值低,不易造成齲齒,而且糖尿病患者可利用,所以在美、日等發(fā)達國家被廣泛用于食品和醫(yī)藥工業(yè)。20世紀70年代以后,各國開始關注以菊粉為原料,以酸法和酶法水解制備果糖。酸法雖然產(chǎn)量高,但副產(chǎn)物多,色素重,分離精制難。80年代,美國、法國人b利時、加拿大等國的研究人員開始研究利用菊粉酶制果糖,其工藝簡單,轉(zhuǎn)化率高,產(chǎn)物純,果糖產(chǎn)量高,可直接生產(chǎn)超高果葡糖漿(UHFGS),果糖含量90%以上。為此美國、英國、丹麥、法國、加拿大等發(fā)達國家都在進行研究。由此可見菊粉酶在果糖及果葡糖漿的生產(chǎn)上具有巨大的開發(fā)應用潛力。外切菊粉酶降解產(chǎn)物以果糖為主且果糖比例高。菊粉酶生產(chǎn)高果糖漿的研究國內(nèi)外都較多,我國對其研究還處于起步狀態(tài)。
7.2利用菊粉酶生產(chǎn)低聚果糖 低聚果糖是一種良好的雙歧因子和水溶性膳食纖維,有防治便秘、抑制腸內(nèi)腐敗物質(zhì)形成、提高機體免疫力、改善脂質(zhì)代謝、降低膽固醇等作用,同時適于糖尿病人食用。比利時ORAFTI公司投資20億比利時法郎,歷時數(shù)十年種植菊藝開發(fā)生產(chǎn)低聚果糖和菊粉,分別作為食糖和油脂代用品(胡學智,1997)。日本明治制果也在大規(guī)模生產(chǎn)。中國食品發(fā)酵研究所、上海醫(yī)藥工業(yè)研究所等已經(jīng)試制成功,正在擴大試驗中。工業(yè)上生產(chǎn)利用菊粉酶生產(chǎn)低聚果糖的方法是由內(nèi)切型菊粉酶水解菊粉而成,產(chǎn)物以低聚果糖為主,純度高,原料便宜,低聚果糖已被視為食品原料,而非食品添加劑。
7.3利用菊粉酶生產(chǎn)酒精 利用菊粉酶生產(chǎn)酒精,國外相關研究較多。國外有報道指出,用Aa-pergillus niger(Schorr-Garlindo等,1995)、K.fragilis(Ohta等,1993)或K.margaritis(Margantis等,1982)發(fā)酵菊粉生產(chǎn)酒精,Aspergll。 niger轉(zhuǎn)化率為明%以上(V/V),后兩者幾乎能完全將菊粉發(fā)酵成酒精。發(fā)酵粗菊芋提取液,不需加其他營養(yǎng)物質(zhì),25 h內(nèi)酒精產(chǎn)量87.8%。
【產(chǎn)品說明】
1、貨源說明
獲得國家QS、GMP、CQC、HALAL、KOSHER等多項認證的生產(chǎn)廠家,保證質(zhì)量,做信譽,值得您信賴。
2、關于開票
支付寶交易和小額訂單≤1000可以開收據(jù)蓋公章;大金額如需開票請聯(lián)系客服,雙方簽訂合同,匯款至公司對公賬戶。
3、關于包裝
我們可以根據(jù)您的需要,按照1~5kg等進行鋁箔包裝,大貨25公斤紙板桶,保證產(chǎn)品在運輸中不受破壞。
4、關于顏色
顏色受批次影響,各批次產(chǎn)品顏色可能會略有差別,請見諒。
5、關于客服
保證7*24小時的客服服務,歡迎您
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